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为了对掺入猪肉成分的比例进行鉴定，本研究拟建立基于同源加尾系统（Homo-tag Assisted Non-dimer system，HANDS）的双重实时PCR检测方法，借助简易数学模型将实时PCR的Ct值（循环阈值）换算成猪肉成分的百分比。根据常见家畜、家禽染色体中的管家基因Myostatin序列设计家禽家畜通用引物和探针序列，针对猪染色体beta actin基因设计猪源性成分特异型引物和探针...
实时荧光定量PCR法快速检测食品中大肠埃希菌
食源性致病菌 食品安全 风险监测
2015/11/16
应用实时荧光定量PCR技术,结合3～5 h的前增菌处理,建立食品中大肠埃希菌的快速、灵敏、定量的检测方法。方法 以大肠埃希菌(ATCC 25922)为参考菌株,对培养基和培养温度进行优化,选择最佳的前增菌培养条件。将不同浓度的参考菌株和样品分别接种前增菌液中培养3～5 h。采用Triton-X 100提取增菌后的DNA,实时荧光定量PCR扩增大肠埃希菌特异性片段。所得Ct与对应的原始(增菌前)参考...
实时荧光定量PCR法与分离培养法检测食品从业人员沙门菌和志贺菌的比较研究
分离培养法 比较 食源性致病菌
2015/11/17
比较实时荧光定量PCR法(RT-PCR)与分离培养法对食品从业人员肠道致病菌沙门菌和志贺菌的检测效果。方法 ①RT-PCR法:用实时荧光定量PCR对体检肛拭子进行初筛；②分离培养法:按照国标方法GB/T 4789.4—2010《食品安全国家标准 食品微生物学检验 沙门氏菌检验》和GB/T 4789.5—2003《食品卫生微生物学检验 志贺氏菌检验》对所筛选出的菌株进行鉴定。结果 RT-PCR法对食...